Adweithiau serolegol: rhywogaethau, defnydd

Mae diagnosteg labordy bron pob un o'r clefydau heintus yn seiliedig ar ganfod gwrthgyrff yn waed y claf, a ddatblygir ar gyfer antigensau'r pathogen, trwy ddulliau o adweithiau serolegol. Fe wnaethon nhw fynd i'r feddygfa o ddiwedd y bedwaredd ganrif ar bymtheg - dechrau'r ugeinfed ganrif.

Fe wnaeth datblygiad gwyddoniaeth helpu i bennu strwythur antigenig microbau a fformiwlâu cemegol eu tocsinau. Caniataodd hyn greu nid yn unig syrwiau therapiwtig, ond hefyd diagnostig. Fe'u ceir trwy gyflwyno pathogenau gwanhau i anifeiliaid labordy. Ar ôl sawl diwrnod o amlygiad o waed cwningod neu lygod, paratoadau a ddefnyddir i adnabod microbau neu eu tocsinau yn cael eu paratoi gan ddefnyddio adweithiau serolegol.

Mae amlygiad allanol adwaith o'r fath yn dibynnu ar amodau ei ffurfiad ac ar gyflwr yr antigensau yn waed y claf. Os yw gronynnau o ficrobau yn anhydawdd, yna maent yn gwisgo, lyse, yn rhwymo neu'n cael eu toddi mewn serwm. Os yw'r antigau yn hydoddol, yna bydd ffenomen y niwtraliad neu'r glawiad yn digwydd.

Mae'r ymateb amgloddio (PA)

Mae agglutiniad adwaith serolegol yn hynod benodol. Mae'n syml i'w gweithredu ac mae'n ddigon clir i bennu presenoldeb antigenau yn serwm y claf yn gyflym. Fe'i defnyddir ar gyfer llunio adwaith Vidal (diagnosis tyffoid a pharatyphoid) a Weigl (typhus).

Mae'n seiliedig ar y rhyngweithio penodol rhwng gwrthgyrff dynol (neu agglutinau) a chelloedd microbaidd (agglutinogens). Ar ôl eu rhyngweithio, ffurfir gronynnau sy'n gwaddod. Mae hwn yn arwydd cadarnhaol. Gellir defnyddio asiantau microbaidd sy'n byw neu'n cael eu lladd, ffyngau, protozoa, celloedd gwaed a chelloedd somatig i lunio'r adwaith .

Yn gemegol, rhannir yr adwaith yn ddau gam:

1. Cyfansoddyn penodol o wrthgyrff (AT) gydag antigens (AH).
2. Nonspecific - dyddodiad o grynhoadau AG-AT, hynny yw, ffurfio glodyn.

Adwaith anglydiad anuniongyrchol (RPHA)

Mae'r ymateb hwn yn fwy sensitif na'r un blaenorol. Fe'i defnyddir i ddiagnosio afiechydon a achosir gan facteria, parasitau intracellogol, protozoa. Mae'n ddigon penodol ei fod yn gallu canfod hyd yn oed crynodiad isel iawn o wrthgyrff.

Er mwyn ei gynhyrchu, rydym yn defnyddio erythrocytes cig oen wedi'i puro a chelloedd gwaed coch rhywun, wedi'u hesgeuluso â gwrthgyrff neu antigenau (mae hyn yn dibynnu ar yr hyn y mae'r technegydd labordy am ei ddarganfod). Mewn rhai achosion, caiff erythrocytes dynol eu trin ag imiwnoglobwlinau. Ystyrir bod adweithiau serolegol erythrocytes wedi digwydd os ydynt wedi adneuo ar waelod y tiwb prawf. Gellir dweud adwaith positif pan fydd y celloedd yn cael eu trefnu ar ffurf ymbarél gwrthdro, gan feddiannu'r gwaelod cyfan. Cyfrifir adwaith negyddol os yw'r celloedd gwaed coch wedi setlo mewn colofn neu ar ffurf botwm yng nghanol y gwaelod.

Mae'r adwaith glawiad (RP)

Mae adweithiau serolegol o'r math hwn yn gwasanaethu i ganfod gronynnau antigen bach iawn. Gall y rhain fod, er enghraifft, proteinau (neu rannau ohonynt), cyfansoddion protein â lipidau neu garbohydradau, rhannau o facteria, a'u tocsinau.

Mae Sera am gynnal yr adwaith yn cael ei heintio gan heintio anifeiliaid yn artiffisial, fel arfer cwningod. Gall y dull hwn dderbyn unrhyw serwm cyflym yn llwyr. Mae llwyfannu adweithiau dyddodiad serolegol yn debyg i'r mecanwaith gweithredu ar yr ymagwedd agglutination. Mae gwrthgyrff a gynhwysir yn y serwm yn cyfuno ag antigens mewn datrysiad coloidal, gan ffurfio moleciwlau protein mawr a adneuwyd ar waelod y tiwb neu ar is-haen (gel). Ystyrir bod y dull hwn yn hynod o benodol ac yn gallu canfod symiau hyd yn oed yn ddibwys o fater.

Wedi'i ddefnyddio i ddiagnosio pla, tularemia, anthracs, llid yr ymennydd a chlefydau eraill. Yn ogystal, mae'n ymwneud ag archwiliad meddygol fforensig.

Adwaith glawiad glawiad

Gellir cynnal adweithiau serolegol, nid yn unig mewn cyfrwng hylif, ond hefyd mewn gel agar. Gelwir hyn yn ddyddodiad gwasgaredig. Gyda'i help, astudir cyfansoddiad cymysgeddau antigenig cymhleth. Mae'r dull hwn yn seiliedig ar y cemotaxis o antigenau i wrthgyrff gwrthryffon ac i'r gwrthwyneb. Yn y gel maent yn symud tuag at ei gilydd ar wahanol gyfraddau ac, yn cyfarfod, yn ffurfio llinellau dyddodiad. Mae pob llinell yn un set o AG-AT.

Adwaith niwtraliad exotoxin ag antitoxin (PH)

Gall serumau antitoxic niwtraleiddio effaith exotoxin, sy'n cynhyrchu micro-organebau. Dyma'r sail ar gyfer yr ymatebion serolegol hyn. Mae microbioleg yn defnyddio'r dull hwn ar gyfer siamau, tocsinau a toxoidau titreiddio, yn ogystal â phenderfynu ar eu gweithgaredd therapiwtig. Mae niwtraliad tocsin yn cael ei bennu gan unedau confensiynol - AE.

Yn ogystal, oherwydd yr adwaith hwn, mae'n bosibl penderfynu ar yr affeithiwr penodol neu nodweddiadol o exotoxin. Defnyddir hyn wrth ddiagnosis tetanws, difftheria, botwliaeth. Gellir cynnal yr astudiaeth "ar y gwydr" ac yn y gel.

Mae'r adwaith lysis (RL)

Mae serwm imiwnedd, sy'n mynd i mewn i gorff y claf, wedi, yn ychwanegol at ei brif swyddogaeth o imiwnedd goddefol, hefyd yn lysio eiddo. Mae'n gallu diddymu asiantau microbaidd, elfennau tramor cellog a firysau sy'n dod i mewn i gorff y claf. Gan ddibynnu ar uniondeb yr gwrthgyrff yn y serwm, mae'r bacteriolysins, cytolysins, spirohetholysins, hemolysins, ac eraill yn unig.

Gelwir y gwrthgyrff penodol hyn yn "ategol". Mae wedi'i gynnwys ym mherfedd yr holl hylifau, bron â strwythur protein cymhleth ac mae'n hynod o sensitif i dwymyn, ysgwyd, asid a golau haul uniongyrchol. Ond yn y wladwriaeth sych, mae'n gallu cynnal ei eiddo lysing hyd at chwe mis.

Mae yna fathau o adweithiau serolegol o'r math hwn:

- bacteriolysis;

- hemolysis.

Perfformir bacteriolysis gan ddefnyddio serwm gwaed y claf a serwm imiwn penodol gyda microbau byw. Os oes digon o gyflenwad yn y gwaed, bydd yr ymchwilydd yn gweld y lysis bacteriol, a bydd yr ymateb yn cael ei ystyried yn gadarnhaol.

Ail ymateb serolegol y gwaed yw bod ataliad erythrocyte y claf yn cael ei drin â hemolysin sy'n cynnwys serwm, a weithredir yn unig ym mhresenoldeb cyfeiliant penodol. Os oes un, mae'r cynorthwy-ydd labordy yn arsylwi diddymiad celloedd gwaed coch. Defnyddir yr adwaith hwn yn helaeth mewn meddygaeth fodern i benderfynu ar y cyflenwad cyflenwol (hynny yw, ei swm lleiaf sy'n ysgogi lysis celloedd gwaed coch) yn y serwm ac ar gyfer dadansoddi cyflenwad rhwymo. Dyma'r ffordd y cynhelir yr ymateb serolegol i'r sifilis - yr ymateb Wasserman.

Mae'r adwaith atgyweirio ategol (RCC)

Defnyddir yr adwaith hwn i ganfod yn serwm gwaed claf gwrthgyrff i asiant heintus, a hefyd i adnabod y pathogen o'i strwythur antigenig.

Hyd at y pwynt hwn, rydym wedi disgrifio adweithiau serolegol syml. Ystyrir bod RSK yn adwaith cymhleth, gan nad yw'n rhyngweithio â dau, ond gyda thair elfen: gwrthgorff, antigen a chyflenwad. Mae ei hanfod yn gorwedd yn y ffaith bod y rhyngweithio rhwng y gwrthgyrff a'r antigen yn digwydd yn unig ym mhresenoldeb proteinau ategol, sy'n cael eu clustnodi ar wyneb y cymhleth AG-AT ffurfiedig.

Mae'r antigensau eu hunain, ar ôl ychwanegu atodol, yn cael newidiadau sylweddol, sy'n nodi ansawdd yr adwaith. Gall fod yn lysis, hemolysis, immobilization, gweithredu bactericidal neu bacteriostatig.

Mae'r adwaith ei hun yn digwydd mewn dau gam:

1. Ffurfio cymhleth antigen-gwrthgorff, sy'n anweledig gweledol i'r ymchwilydd.
2. Newid antigen o dan y camau ategol. Yn aml, gellir olrhain y cyfnod hwn i'r llygad noeth. Os nad yw'r ymateb gweledol yn weladwy, yna defnyddir system ddangosydd ychwanegol i ganfod newidiadau.

System ddangosydd

Mae'r adwaith hwn yn seiliedig ar gyflenwad rhwymo. Yn y tiwb prawf un awr ar ôl y ffurfiad DSC, caiff erythrocytes puro'r hwrdd a serwm hemolytig nad ydynt yn cael eu cyflenwi'r rhain eu hychwanegu. Pe bai cyflenwad heb ei adfer yn y tiwb, bydd yn ymuno â'r cymhleth AG-AT a ffurfiwyd rhwng celloedd maidlon y gwaed a'r hemolysin ac yn achosi eu diddymiad. Bydd hyn yn golygu bod y RCC yn negyddol. Os yw'r celloedd gwaed coch yn aros yn gyfan, yna, yn ôl eu trefn, mae'r adwaith yn gadarnhaol.

Mae'r adwaith hemagglutination (RGA)

Mae yna ddau ymateb sylfaenol hemagglutination yn wahanol. Mae un ohonynt yn serolegol, fe'i defnyddir i bennu grwpiau gwaed. Yn yr achos hwn, mae'r erythrocytes yn rhyngweithio â gwrthgyrff.

Ac nid yw'r ail ymateb yn cyfeirio at serolegol, gan fod y celloedd gwaed coch yn ymateb gyda'r hemagglutinau a gynhyrchwyd gan y firysau. Gan fod pob asiant yn gweithredu dim ond ar erythrocytes penodol (cyw iâr, cig oen, mwnci), yna gellir ystyried yr adwaith hwn yn eithaf penodol.

Deall, adwaith cadarnhaol neu negyddol, gallwch chi trwy leoli celloedd gwaed ar waelod y tiwb prawf. Os yw eu llun yn debyg i ambarél gwrthdro, yna mae'r firws a ddymunir yn bresennol yn waed y claf. Ac os yw'r holl gelloedd gwaed coch yn cael eu ffurfio fel colofn arian, yna nid oes pathogenau anhysbys.

Adwaith ataliad hemagglutiniad (RTGA)

Mae hwn yn adwaith hynod benodol sy'n eich galluogi i bennu math, math o firws, neu bresenoldeb gwrthgyrff penodol yn serwm gwaed y claf.

Mae ei hanfod yn gorwedd yn y ffaith bod yr gwrthgyrff yn ychwanegu at y tiwb prawf gyda'r deunydd prawf yn atal dyddodiad antigenau ar y celloedd gwaed coch, gan atal hemagglutiniad. Mae hwn yn arwydd ansoddol o bresenoldeb antigau penodol yn y gwaed i feirws penodol a geisir amdano.

Adwaith immunofluorescence (RIF)

Mae'r ymateb yn seiliedig ar y gallu i ganfod cymhlethdodau AG-AT mewn microsgopeg lliwgar ar ôl eu trin â lliwiau fflworocromig. Mae'r dull hwn yn hawdd i'w drin, nid oes angen dyraniad diwylliant pur ac nid yw'n cymryd llawer o amser. Mae'n anhepgor ar gyfer diagnosis cyflym o glefydau heintus.

Yn ymarferol, rhannir yr adweithiau serolegol hyn yn ddau fath: uniongyrchol ac anuniongyrchol.

Cynhyrchir RIF Uniongyrchol gydag antigen, a gaiff ei drin yn flaenorol â serwm fflwroleuol. Ac yn anuniongyrchol, mae'r cyffur yn cael ei drin yn gyntaf â diagnosticum confensiynol sy'n cynnwys antigensau i'r gwrthgyrff dymunol, ac yna caiff serwm lledaenuol, sy'n benodol ar gyfer proteinau'r cymhleth AG-AT, ei ail-gymhwyso ac mae'r celloedd microbaidd yn dod yn amlwg â microsgopeg.