Dulliau microbiolegol o ddŵr, pridd, aer

Micro-organebau yw'r creaduriaid lleiaf, mwyaf poblogaidd, yn eang iawn. Fe'u darganfyddir ym mhob amgylchedd (aer, pridd, dŵr), yn y corff dynol ac anifeiliaid, mewn planhigion.

Mae'r amrywiaeth ansoddol a nifer y micro-organebau yn dibynnu'n bennaf ar gyfansoddion maeth. Fodd bynnag, mae'r gyfradd lleithder, tymheredd, awyru, gweithrediad pelydrau haul a ffactorau eraill hefyd yn bwysig iawn.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Mae dulliau astudiaeth iechyd-microbiolegol o gyfryngau naturiol yn caniatau presenoldeb micro-organebau pathogenig, penderfynu ar eu rhif ac, yn unol â'r canlyniadau a gafwyd, datblygu mesurau i ddileu neu atal clefydau heintus. Yn ogystal, mae angen cyfrifo meintiol ar gyfer modelu ecosystemau a datblygu egwyddorion ar gyfer rheoli prosesau naturiol. . Gadewch i ni ystyried ymhellach, beth yw'r dulliau o ymchwil microbiolegol .

Pridd

Fe'i hystyrir gan wyddonwyr fel un o'r ffyrdd posibl o drosglwyddo patholegau heintus. Gyda gwaharddiadau pobl neu anifeiliaid sâl, mae micro-organebau pathogenig yn treiddio'r pridd. Gall rhai ohonynt, yn enwedig, sborau, oroesi yn y ddaear ers amser hir (weithiau sawl deg o flynyddoedd). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Mae pathogenau o heintiau peryglus o'r fath, fel tetanus, anthrax, botulism, ac ati, yn mynd i'r pridd. Mae dulliau ar gyfer astudiaeth ficrobiolegol glanweithiol o'r pridd yn ei gwneud hi'n bosibl pennu'r "rhif microbaidd" (nifer y micro-organebau mewn gram o bridd), yn ogystal â'r mynegai coli (nifer yr E. coli) .

Dadansoddiad pridd: gwybodaeth gyffredinol

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Dylai'r dulliau o ymchwil pridd microbiolegol gynnwys, yn gyntaf, microsgopeg uniongyrchol a hadu ar gyfrwng maeth trwchus . Mae poblogaethau micro-organebau a'u grwpiau sy'n byw yn y pridd yn wahanol i'w sefyllfa tacsonomeg a swyddogaethau ecolegol. Mewn gwyddoniaeth, maent yn unedig o dan y term cyffredinol "biota pridd". Ground yw cynefin nifer fawr o ficro-organebau. Mewn gram o bridd mae rhwng 1 a 10 biliwn o'u celloedd. Yn yr amgylchedd hwn, daw dadansoddiad o sylweddau organig gyda chyfranogiad amrywiol ficro-organebau safaffytaidd.

Dull microsgopeg o ymchwil microbiolegol: camau

Mae'r dadansoddiad o'r amgylchedd yn dechrau gyda samplu. I wneud hyn, defnyddiwch gyllell alcohol wedi ei lanhau a'i rwbio o'r blaen (gallwch ddefnyddio rhaw). Ar ôl hyn, paratoir y sampl. Y cam nesaf yw cyfrif celloedd ar draeniau staen. Gadewch i ni ystyried pob cam ar wahân.

Samplu

Wrth ddadansoddi pridd âr, fel rheol, cymerir samplau o ddyfnder yr haen gyfan. Yn gyntaf, tynnwch 2-3 cm o frig y pridd, gan y gallai gynnwys microflora dramor. Wedi hynny, cymerir monolithiaid o safle a astudir y pridd. Dylai hyd pob un ohonynt gyfateb i drwch yr haen y mae angen i chi gymryd sampl ohoni.

Ar blot o 100-200 metr sgwâr. M, 7-10 samplau yn cael eu cymryd. Mae pwysau pob un yn ymwneud â 0.5 kg. Rhaid cymysgu'r samplau yn drylwyr mewn bag. Ar ôl hyn, cymerwch sampl ar gyfartaledd sy'n pwyso oddeutu 1 kg. Dylid ei roi mewn bag parch (di-haint), wedi'i ymgorffori mewn bag meinwe. Cyn dadansoddi uniongyrchol, storir y sampl yn yr oergell.

Paratoi ar gyfer ymchwil

Mae'r pridd cymysg yn cael ei dywallt ar y gwydr sych. Yn rhagarweiniol mae'n rhaid ei chwalu gydag alcohol a'i losgi dros y llosgwr. Gan ddefnyddio sbeswla, mae'r pridd wedi'i gymysgu'n drylwyr a'i osod yn gyfartal. Heb fethu, mae angen diddymu gwreiddiau, elfennau allanol eraill. Ar gyfer hyn, defnyddir tweezers. Cyn gweithio, caiff y tweezers a'r sbeswla eu cywasgu dros y llosgydd a'u hoeri.

O rannau bach o'r pridd a ddosberthir dros y gwydr, cymerir darnau bach. Fe'u pwyso mewn cwpan porslen ar raddfa dechnegol. является специальная обработка образца. Cam gorfodol y dull microsgopeg o ymchwiliad microbiolegol yw prosesu arbennig y sampl. Mae angen paratoi 2 fflasg anffafriol ymlaen llaw. Ni ddylai eu galluedd fod yn fwy na 250 ml. Mae 100 ml o ddŵr tap yn cael ei dywallt i mewn i un o'r fflasgiau. O'i fod yn cymryd 0.4-0.8 ml o hylif ac yn gwlychu hongian y pridd i wladwriaeth godail. Rhaid rhoi'r gorau i'r cymysgedd gyda bys neu blaster rwber am 5 munud.

Gyda dŵr o'r fflasg cyntaf, trosglwyddir y màs pridd i fflasg wag. Yna caiff ei rwbio eto. Wedi hynny, trosglwyddir y màs i'r fflasg ger fflam y llosgwr. Mae'r cynhwysydd gyda'r ataliad pridd wedi'i ysgwyd ar y rocker am 5 munud. Ar ôl hynny, mae'n gadael i setlo am tua 30 eiliad. Mae hyn yn angenrheidiol er mwyn i gronynnau mawr setlo. Ar ôl hanner munud, defnyddir y màs i baratoi'r paratoad.

Cyfrif celloedd ar dameidiau sefydlog

, разработанному Виноградским. Cynhelir astudiaeth microsgopig uniongyrchol o'r pridd yn ôl y dull ymchwil microbiolegol a ddatblygwyd gan Vinogradsky. Mewn nifer benodol o'r ataliad a baratowyd, cyfrifir nifer y celloedd micro-organeb. Mae'r astudiaeth o gribau sefydlog yn caniatáu i chi arbed cyffuriau am amser hir a pherfformio cyfrifiadau ar unrhyw adeg gyfleus.

Mae paratoi'r cyffur fel a ganlyn. Cymhwysir cyfaint benodol o'r ataliad (fel arfer 0.02-0.05 ml) gan ddefnyddio micropipedyn ar sleid. Ychwanegir at ostyngiad o ddatrysiad agar-agar (cymysgeddau polysacarid agaropectin ac agarose o wwn brown a choch y Môr Du), wedi'i gymysgu'n gyflym a'i ddosbarthu ar ardal o 4-6 metr sgwâr. Gweler Mae'r drwg yn sychu mewn aer ac yn sefydlog am 20-30 munud. Alcohol (96%). Nesaf, mae'r gwaith yn cael ei wlychu gyda dŵr distyll, wedi'i osod yn yr ateb erythrosin carolaidd am 20-30 munud.

Ar ôl staenio, caiff ei olchi a'i sychu mewn aer. Cyfrifir y celloedd ag amcan trochi.

Seu ar gyfryngau trwchus

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Mae dulliau microsgopeg o ymchwil microbiolegol yn ei gwneud hi'n bosibl nodi nifer fawr o ficro-organebau. Ond er gwaethaf hyn, ystyrir y dull hau fwyaf cyffredin yn ymarferol. Mae ei hanfod yn cynnwys hau maint y paratoad (atal y pridd) mewn pryd Petri ar gyfrwng trwchus.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Mae'r dull hwn o ymchwil microbiolegol yn ein galluogi i ystyried nid yn unig y swm, ond hefyd y cyfansoddiad grŵp, ac mewn rhai achosion cyfansoddiad rhywogaethau'r fflora microsgopig. Mae cyfrif nifer y cytrefi fel rheol yn cael ei wneud o waelod y dysgl Petri mewn golau a drosglwyddir. Ar yr adran gyfrifo, rhoddir y dot gyda marciwr neu inc.

Dadansoddiad dŵr

Mae microflora corff dŵr, fel rheol, yn adlewyrchu cyfansoddiad microbaidd y pridd gerllaw. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Yn hyn o beth, mae'r dulliau astudiaeth iechydol a microbiolegol o ddŵr a phridd o bwysigrwydd ymarferol arbennig wrth astudio cyflwr ecosystem arbennig. Mae pyllau ffres yn cynnwys, fel rheol, cocci, bacteria siâp gwialen.

Mae anerobiaid mewn dŵr yn cael eu canfod mewn symiau bach. Fel rheol, maent yn atgynhyrchu ar waelod y cronfeydd dŵr, mewn silt, gan gymryd rhan yn y prosesau puro. Mae'r microflora o'r cefnforoedd a'r moroedd yn cael ei gynrychioli yn bennaf gan bacteria halen-cariadus (haloffilig).

Mae bron i ddim ffynhonnau artesaidd i'w gweld mewn micro-organebau. Mae hyn oherwydd gallu hidlo haen y pridd.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Y dulliau a dderbynnir yn gyffredinol o brofion dŵr microbiolegol yw penderfynu ar y nifer microbaidd a'r mynegai colitis neu'r colifform. Mae'r dangosydd cyntaf yn nodweddu nifer y bacteria mewn 1 ml o hylif. Y mynegai coli yw'r nifer o E. coli sy'n bresennol mewn litr o ddŵr, a'r tatws colit yw'r lleiafswm neu wanhad mwyaf posibl o'r hylif y gellir eu canfod o hyd.

Penderfynu'r rhif microbaidd

Mae'r dull hwn o ymchwil dŵr microbiolegol glanweithdra fel a ganlyn. Mewn 1 ml o ddŵr, penderfynir pennu faint o anaerobau cyfadrannol ac aerobau mesoffilig (canolraddol) sy'n galluogi agar cig (y prif gyfrwng maetholion) ar 37 ° C. Yn ystod y dydd i ffurfio cytrefi, gweladwy gyda chynnydd o 2-5 r. Neu gyda'r llygad noeth.

является посев. Mae cyfnod allweddol y dull hwn o ymchwil dŵr microbiolegol yn hau. O bob sampl, caiff o leiaf 2 gyfrol wahanol eu hau. Wrth ddadansoddi dŵr tap, mae 1-0.1 ml o hylif pur yn cael ei ychwanegu at bob cwpan a 0.01-0.001 ml o hylif halogedig. Ar gyfer hau 0.1 ml neu lai, caiff yr hylif ei wanhau â dŵr distyll (di-haint). Paratoi gwaniadau degwaith yn gyson. Mae 1 ml o bob un ohonynt yn cael ei ychwanegu at ddau fwyd Petri.

Mae'r gwanhau'n cael eu llenwi ag agar maetholion. Rhaid ei doddi a'i oeri i 45 deg. Ar ôl cymysgu'n egnïol, caiff y cyfrwng ei adael ar wyneb llorweddol i gadarnhau. Ar 37 gradd. Mae cnydau yn cael eu tyfu trwy gydol y dydd. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Mae'r dull o ymchwil dŵr microbiolegol dan ystyriaeth yn ei gwneud hi'n bosibl ystyried y canlyniadau ar y platiau hynny lle mae nifer y cytrefi yn amrywio o 30 i 300.

Awyr

Fe'i hystyrir yn gyfrwng cludo ar gyfer micro-organebau. являются седиментация (оседание) и аспирация. Y prif ddulliau o astudio microbiolegol aer yw gwaddodion (gwaddod) a dyhead.

Mae microflora'r amgylchedd awyr wedi'i rannu'n amodol yn amrywiol ac yn gyson. Mae'r cyntaf yn cynnwys burum, cocci sy'n ffurfio pigment, bagil sporiferous, gwialen a micro-organebau eraill, sy'n gwrthsefyll sychu, amlygiad ysgafn. Nid yw cynrychiolwyr y microflora amrywiol, sy'n treiddio i'r awyr o'u cynefin arferol, yn para am eu hyfywedd.

Ym myd awyr mawr mae micro-organebau yn llawer mwy nag yn amgylchedd awyr ardaloedd gwledig. Dros y moroedd, ychydig iawn o goedwigoedd y facteria. Hwylusir clirio aer trwy ddyodiad: eira a glaw. Mewn safleoedd caeedig o ficrobau llawer mwy nag mewn mannau agored. Mae eu nifer yn cynyddu yn ystod y gaeaf yn absenoldeb adferiad rheolaidd.

Gwaddodion

считается простейшим. Mae'r dull hwn o ymchwil microbiolegol mewn microbioleg yn cael ei ystyried yn symlaf. Mae'n seiliedig ar setlo dolydd a gronynnau ar wyneb yr agar mewn dysgl petri agored o dan weithred disgyrchiant. Nid yw'r dull gwaddod yn pennu'n gywir nifer y bacteria yn yr awyr. Y ffaith yw ei bod braidd yn anodd dal ffracsiynau bach o ronynnau llwch a diferion bacteriol ar gwpan agored. Mae gronynnau mawr iawn yn cael eu cadw ar yr wyneb.

Ni ddefnyddir y dull hwn wrth ddadansoddi aer atmosfferig. Nodweddir yr amgylchedd hwn gan amrywiadau mawr yng nghyflymder llif yr aer. Fodd bynnag, gellir defnyddio gwaddodion yn absenoldeb mwy o offer soffistigedig neu ffynhonnell o drydan.

Mae'r dull o Omelyansky yn cael ei benderfynu ar y nifer microbaidd. Yn unol ag ef, am 5 munud ar wyneb agar gydag ardal o 100 metr sgwâr. Mae Cm yn setlo'r nifer o facteria sy'n bresennol mewn 10 litr o aer.

Gorchymyn 535 "Ar uno unedau ymchwil microbiolegol"

Mae dadansoddiad bacteriolegol yn lle pwysig mewn cymhleth o weithgareddau clinigol a labordy sydd wedi'u hanelu at ddiagnosis, atal a thrin amrywiaeth o glefydau heintus. Fodd bynnag, nid ydynt yn gyfyngedig i ymchwil amgylcheddol.

Yn arbennig o bwysig yw'r ddadansoddiad bacteriolegol o ddeunydd biolegol mewn sefydliadau meddygol. I'r ymchwiliadau a wariwyd mewn sefydliadau meddygol, gwneir gofynion a godwyd. Pwrpas y Gorchymyn "Ar Uniad Dulliau Ymchwil Microbiolegol" yw gwella dadansoddiad bacteriolegol, gwella ansawdd ac effeithiolrwydd diagnosis microbiolegol.

Archwiliad microsgopig o doriadau mewn merched

Mae'n ddull dadansoddi allweddol wrth ddiagnosis heintiau a drosglwyddir yn rhywiol a chlefydau manteisiol (a achosir gan facteria oportunistaidd).

Mae dadansoddiad microsgopeg yn caniatáu asesu cyfansoddiad ansoddol a meintiol microflora, gwirio cywirdeb samplu. Er enghraifft, mae presenoldeb epitheliwm vaginaidd mewn smear sy'n cael ei gymryd o'r gamlas ceg y groth yn dangos bod y rheolau samplu biolegol yn groes.

Mae'n werth dweud bod problemau penodol yn gyffredinol yn yr archwiliad microbiolegol yn yr achos hwn. Maent yn gysylltiedig â'r ffaith bod microflora amrywiol fel arfer yn amrywio mewn gwahanol gyfnodau oedran yn rhannau isaf y llwybr genynnol. Er mwyn gwella effeithiolrwydd yr astudiaeth, datblygwyd rheolau unedig.

Diagnosis o heintiau firaol

Fe'i cynhelir trwy ddulliau o ganfod pathogenau RNA a DNA. Maent yn seiliedig yn bennaf ar benderfynu dilyniannau niwcleotid mewn deunydd patholegol. Ar gyfer hyn, defnyddir chwilod moleciwlaidd. Maent yn cael eu cynhyrchu yn artiffisial asidau niwcleig sy'n ategu asidau firaol wedi'u labelu â label ymbelydrol neu biotin.

Un nodwedd arbennig o'r dull yw copïo lluosog o ddarn DNA penodol, sy'n cynnwys cannoedd (neu ddegau) o barau niwcleotid. Y mecanwaith o ddyblygu (copïo) yw y gall y gwaith cwblhau dim ond mewn rhai blociau. I'u creu, defnyddir cynheuwyr (cynheuwyr). Maent yn cael eu syntheseiddio oligonucleotidau.

Mae diagnosteg PCR (adwaith cadwyn polymerase) yn hawdd i'w berfformio. Mae'r dull hwn yn eich galluogi i gael canlyniad yn gyflym gan ddefnyddio ychydig o ddeunydd patholegol. Gyda chymorth diagnosteg PCR, canfyddir heintiau aciwt, cronig a chudd (cudd).

Gyda sensitifrwydd, ystyrir bod y dull hwn yn well. Fodd bynnag, ar hyn o bryd nid yw'r systemau prawf yn ddigon dibynadwy, felly ni all diagnosteg PCR ddisodli'r dulliau traddodiadol yn llwyr.